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细胞名称 HSF 人皮肤成纤维细胞
生长特性 贴壁
形态特性 上皮细胞样
培养条件 DMEM/F12+10%FBS+1%双抗
生长条件 空气温度:37C 气相:5%C02
传代方注 1:2-1:3传代 ，2~3 天换液/传代
冻存条件 90%PBS+10DNSO现配现用
支原休检测 阴性
细胞收到后操作流程
1.收到细胞拿回实验室后，先打开外包装，用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，放到显微镜下-观察细胞状态。因运输问题，细胞会有不同程度影响，先不要打开培养瓶盖，放到培养箱静2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态(所拍照片作为后期售后依据)。置4 小时左右，以便稳定细胞状态建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态3.贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80%时，根据情况传代，若细胞未超过 80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，原瓶(T25 瓶)保6-8m 完全培养液继续培养，直至4.悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体转移至离心管，1000RPM 离心5 分钟，弃去上清液，管底细胞密度超过 80%以后再进行传代细胞沉淀加入 10ml 完全培养基吹打、重悬。放入新的细胞培养瓶/皿中培养过夜，根据细胞密度及生长情况分瓶传代。
三、细胞常规培养步骤(请严格遵守无菌操作)
1) 复苏细胞:将含有 1 细胞悬液的冻存管在37C水浴中迅速摇晃解冻，加入 5 培养基混合均匀。在 1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 6cm m中，加入约 6m 培养基，培养过夜)，第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
T25培养瓶形式
收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。2.将细胞放入 37 度培养箱中预温 3-4 小时后再做处理，以稳定细胞状态3.显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存 (40X,100X,200X各一张)前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到状态良好。
4.D贴壁细胞:若细胞密度低于 80%，无菌操作去掉培养基。加入准备的5-6ml 培养基放 37 度培养箱培养，待细胞密度达到 80%以上进行传代。密度 80%以上，可以将细胞传代处理。
@悬浮细胞:将瓶内所有培养基离心收集，重悬计数根据密度进行分瓶密度在 3-5x10A5/ml 为宜。特别说明:瓶内运输培养基不能继续使用，请根据培养条件配置新鲜培养基收到后第一次传代建议 1:2，注意是传成 2个 T25 瓶或2个 6cm 皿，千万不要传2个 10cm 的皿，底面积不一样
15ml离心管形式
仅限于悬浮细胞发货。75%酒精棉球擦拭 15ml 离心管外部去封口膜将15ml 细胞悬液均匀接种到 2 个 T25 规格培养瓶(不离心)，第二天观察细胞状态，根据密度进行换液或分瓶。
2ml 冻存管形式
收到细胞后，检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损干冰已完全挥发等问题，请即时联系。正常请进行以下操作:将细胞取出转移至液氮或-80 度冰箱保存，建议尽早复苏。复苏第一管如有活性状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:未与我方联系擅自复苏第二管出现问题不予售后。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法:弃去培养瓶中上清液，用不含、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次2.加 1-2ml 消化液 (0.25%Trypsin-0,53mM EDTA)于培养瓶中置于 37C培养箱中消化 1-21、若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加 5-6ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，3.吹打匀后吸出，在 1000RPM条件下离心5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀4.将细胞悬液按合适的比例分到新的培养瓶或培养中，加入对应体积的培养基后放入增养箱培养。
方法一:收集细胞，1000RPM条件下离心5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法将细胞悬液按合适的比例分到新的培养瓶或培养皿中,加入对应体积的培养基后放入培养箱方法二:可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按合适的比例分到新的培养瓶或培养皿中，加入对应体积的培养基后放入培养箱培养。培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心5 分钟，去除上清按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为 90%FBS+10%DMSO。
1收到细胞后请尽快更换为含 10% FBS 的新鲜培养基，不建议使用原瓶中运输用培养基特别注意:2.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系实验室。3.细胞任何售后问题，均需拍照存档并及时联系客服。